在重组蛋白的表达纯化中,通常会通过添加融合标签(如MBP、His、GST)的方式来提高目标蛋白的可溶性并促进其正确折叠等。
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MBP(Maltose Binding Protein)标签:能显著提高蛋白质的溶解性和稳定性,从而提高产量。
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His(Histidine)标签:广泛用于通过固定化金属亲和层析(IMAC)纯化重组蛋白。His标签的优势有:标签本身分子量小、对重组蛋白的功能和应用几乎没有影响,且具有较低的免疫原性。
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GST(Glutathione S-Transferase)标签:能够增强融合蛋白的可溶性、促进表达,并且方便纯化和后续实验操作。通过GST标签与固定化的谷胱甘肽亲和作用,能够高效地从表达体系中分离纯化融合蛋白,并且有助于保持蛋白的生物活性和抗原性。
根据实际需求,某些融合标签需要被去除。使用特定的蛋白酶精准、高效地去标签对于获得结构、功能“原汁原味”的目标蛋白至关重要。常用的蛋白酶如下表所示:
常见的用于融合标签切除的蛋白酶对比

TEV蛋白酶(TEV Protease,目录号:PE004)来源于烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus, TEV),具备很高的位点特异性,相比凝血酶、Factor Xa和肠激酶等蛋白酶,TEV酶对底物序列的识别更为精准,常用于从融合蛋白中去除标签,如 GST、MBP、His 等。
TEV酶可特异性识别七肽序列:
Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-↓-Gly/Ser(ENLYFQ↓G/S)

TEV酶特异性识别序列和切割位点示意图
产品亮点
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专一性强,几乎无非特异性切割,保证蛋白完整性。
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反应温和,适用于大多数蛋白;在 4–30°C 下均表现稳定活性,适配更广泛体系。
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切割后,目的蛋白的N端仅保留一个额外的 Gly 或 Ser 残基。
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采用大肠杆菌表达,纯度达99%;带 His-tag,可通过 Ni-NTA 轻松去除酶残留。
使用建议
1× TEV Reaction Buffer: 50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.5mM EDTA, 1mM DTT
酶切反应条件:在pH为5.5-8.5和温度为4℃-30℃都有活性,一般可选择4℃过夜或30℃反应1小时。
数据展示
每个反应添加 15μg 融合蛋白和一定量的TEV蛋白酶。30℃经过1小时反应后用15%的 SDS-PAGE胶检测酶切效果。

产品信息
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